發布日期:2023-08-16 |
宮頸癌是全球范圍內女性生殖系統最常見的惡性腫瘤之一,廣泛性全子宮切除加盆腔淋巴結清掃術仍為宮頸癌的常規術式。然而此類手術可能會導致神經損傷、淋巴水腫等并發癥的發生,同時也明顯降低了患者的生活質量。前哨淋巴結是惡性腫瘤發生淋巴轉移的第一站淋巴結,對惡性腫瘤區域淋巴結的轉移情況及指導淋巴結清掃具有重要意義,通過前哨淋巴結活檢可以判斷區域淋巴結的轉移狀態。目前,前哨淋巴結示蹤技術僅能做到對前哨淋巴結的定位,尚無法在術中直接評估淋巴結的轉移狀態。因此,能在術中示蹤前哨淋巴結的同時實現對宮頸癌前哨淋巴結轉移狀態的評估,將具有非常重大的臨床意義。
目前臨床中應用的前哨淋巴結示蹤技術包括染料法、放射性核素法和近紅外熒光成像法,但均有其局限性,沒有任何一種技術具有絕對優勢。表面增強拉曼光譜(SERS)納米探針因其特有的指紋圖譜具有非常高的靈敏性和特異性,使其在生物醫學成像方面有明顯優勢。SERS納米探針作為腫瘤成像技術已得到了極大關注,但其在示蹤前哨淋巴結中的研究幾乎空白。
本文分享了上海交通大學團隊使用如海便攜式拉曼光譜儀(SEED3000)在前哨淋巴結拉曼成像中的應用案例。老師通過在活體內探索介孔硅包被的縫隙增強拉曼探針(GERTs)進入前哨淋巴結的動態過程,明確其示蹤前哨淋巴結的時間窗口;并利用便攜式拉曼光譜儀在活體動物體內進行前哨淋巴結示蹤實驗,實現術中實時探測的目的。
2.1測試方法
實驗以BALB/c小鼠為實驗樣本。取小鼠4只,分別于左側后足爪墊皮下注射1 nM MS-GERTs探針生理鹽水溶液25μL,自由活動24h。1%戊巴比妥鈉腹腔注射,麻醉小鼠。麻醉成功后,小鼠仰臥位固定,分離暴露左側后足腘窩淋巴結,用如海光電的SEED3000便攜式拉曼探測儀對前哨淋巴結部位進行拉曼信號探測。檢測參數設置為:使用激光為785 nm激發波長,激光功率密度為2.4×103 W/cm2,積分時間5 s,每個淋巴結檢測5個單點(上、下、中、左、右),收集拉曼光譜。
2.2測試結果
小鼠麻醉后,用手持式拉曼探測儀對前哨淋巴結區域進行定點檢測,每個淋巴結檢測5個部位(圖1)。結果發現淋巴結任何一個部位都能探測到非常明顯的探針拉曼信號,表明使用如海便攜式拉曼光譜儀SEED3000可以對前哨淋巴結進行實時定位。
圖1 手持式拉曼探測儀示蹤前哨淋巴結。(a)活體內拉曼探測,圖中比例尺為1 cm;(b)前哨淋巴結檢測的5個部位(7上,8右,9下,10左,11中),圖中比例尺為400 μm;(c)b中5個部位7-11相對應的拉曼光譜
[1]包州州. 縫隙增強拉曼探針在宮頸癌轉移前哨淋巴結中的成像研究[D]. 上海交通大學, 2020.
SEED3000便攜式拉曼光譜儀
SEED3000便攜式拉曼光譜儀是一款高性價比的785 nm小型拉曼光譜儀;結構簡單,檢測快速,預留USB和串口通信,方便多功能系統集成,可滿足實驗室、野外以及工業現場等多種實驗場景。已被廣泛應用于食品安全、國防安全、珠寶鑒定、醫藥等需對原材料快速篩選、現場快速檢測及物質分析鑒定等行業。
◆ 高度集成,應用靈活,輕巧便捷,方便攜帶;
◆ 可適配光譜范圍在200 cm-1~3200 cm-1;
◆ 高穩定性,光譜響應穩定性<2% @ 2hrs;
◆ 高分辨率,分辨率最佳可達4 cm-1。